Кріоконсервація яйцеклітин та сперматозоїдів
Що таке кріоконсервація?
Сучасні технології розвиваються з шаленою швидкістю. Зокрема медицина зробила величезний стрибок у вирішенні проблеми безпліддя.
Технологія глибокої заморозки або так звана кріоконсервація стала проривом у сфері репродуктології. Вона дозволяє швидко заморозити і зберігати клітини або інший біологічний матеріал протягом багатьох років.
Способи проведення кріоконсервації
Під час кріоконсервації клітини швидко заморожують за допомогою рідкого азоту за температури -196 °C. При цьому в матеріалі гальмуються всі біологічні процеси зі збереженням життєздатності і можливістю подальшого використання.
Існують два способи кріоконсервації:
- Вітрифікація – найбільш поширений. Сперму або яйцеклітину занурюють в кріопротектор, який перешкоджає утворенню кристалів льоду. Після цих маніпуляцій матеріал обробляють рідким азотом і зберігають у спеціальних кріостатах роками.
- Поступова дегідратація – метод, який дозволяє повільно видаляти рідину і замінювати її на кріопротектор. Після цього проводять заморозку за допомогою азоту.
Які існують види кріоконсервації?
У репродуктології кріоконсервацію поділяють на три великі групи:
- Кріоконсервація статевих клітин жінки
- Кріоконсервація статевих клітин чоловіка
- Кріоконсервація ембріонів
Кріоконсервація яйцеклітин
Кріоконсервація яйцеклітин вважається інноваційною розробкою у сфері репродуктивної медицини. Ця методика дозволяє в лабораторних умовах проводити заморожування жіночих статевих клітин в рідкому азоті за температури мінус 196 ° C. У такому вигляді матеріал може зберігатися тривалий період для подальшого використання в програмах ЕКЗ у будь-якому віці.
Показання до проведення
З роками кількість ооцитів знижується, а їхня якість погіршується. Тому найкращим віком для заморозки власних статевих клітин вважається 20-25 років. Це період, коли репродуктивна система в хорошому стані, а ризик народження дитини з генетичними відхиленнями мінімальний.
Але, якщо жінка трохи старша, або на неї чекає складна операція, що може вплинути на репродуктивну функцію організму, їй теж варто звернути увагу на цю послугу. Також, якщо зробити кріоконсервацію яйцеклітин до початку лікування онкології, це дозволить жінці в подальшому мати повністю здорову власну дитину після досягнення стійкої ремісії.
Методи і етапи процедури
Для швидкої заморозки ооцитів використовується технологія вітрифікації. Саме цей метод дозволяє досягти показника 98% вдалого розморожування.
Процедура кріоконсервації яйцеклітин складається з таких етапів:
- Повне обстеження. Жінка здає необхідні клінічні аналізи, проходить інструментальні та лабораторні дослідження, огляди у лікаря-терапевта, акушера-гінеколога і репродуктолога, а також, якщо потрібно, отримує консультації суміжних фахівців.
- Протизаплідна терапія. Її призначають на кілька тижнів, щоб яєчники відновилися і були готові до гормональної стимуляції.
- Гормональна стимуляція. Вона необхідна для отримання максимально можливої кількості зрілих фолікулів з яйцеклітинами. Заморожувати краще відразу кілька ооцитів, але в природних умовах організм жінки виробляє 1-2 яйцеклітини за один менструальный цикл. Цього недостатньо для проведення успішної заморозки і розморожування. Гормональні препарати дозволяють збільшити кількість яйцеклітин до десяти і більше.
- Пункція фолікулів і забір ооцитів з використанням тонкої голки. Процедура проводитися під седацією пацієнтки для уникнення больових відчуттів і переживань.
- Заморозка жіночих статевих клітин за допомогою методу вітрифікації. Він використовується для затвердіння клітин до склоподібного стану без утворення кристалів льоду за допомогою високої концентрації кріопротекторів. У клітинах, які знаходяться в стані заморозки, зупиняються всі біологічні процеси. У той же час яйцеклітини повністю зберігають свою структуру і функції.
- Переміщення вітрифікованих яйцеклітин на спеціальні прилади – кріотопи, а далі – в контейнери – посудини Дьюара для тривалого збереження. Кожна порція матеріалу має індивідуальне маркування.
Заморожені молоді яйцеклітини можуть зберігатися десятки років. Це абсолютно безпечна технологія, яка вимагає уважного підходу і точного дотримання всіх вимог спеціаліста, що її проводить.
Кріоконсервація тканини яєчника
Кріоконсервація тканини яєчника – революційний метод у репродуктології, який використовується для збереження фертильності пацієнток різного віку.
На відміну від заморожування яйцеклітин, він застосовується, коли немає можливості отримати ооцити. До прикладу, якщо йдеться про дівчат, що не досягли статевої зрілості.
Завчасна кріоконсервація тканини яєчника дозволяє жінці зберегти можливість завагітніти і згодом народити здорову дитину, якщо попереду серйозне лікування, що може призвести до безпліддя.
Як проходить процедура кріоконсервації тканини яєчника?
- Жінка звертається в клініку, лікар збирає детальний анамнез і відправляє її на обстеження. Паралельно укладається договір з кріобанку, де будуть зберігатися частки яєчника. Жінку готують до операції, призначається конкретний день її проведення.
- Забір матеріалу проводять хірургічним методом за допомогою лапароскопії. Це малоінвазивна хірургічна операція. Через маленькі проколи на животі відбирають частку кори молодого і здорового яєчника, яку одразу ж поміщають в холодовий контейнер і транспортують в лабораторію.
- Лаборант досліджує матеріал на наявність здорових фолікулів і проводить підготовку тканини до заморожування. Він нарізає матеріал тоненькими смужками та видаляє рідину з клітин, щоб запобігти утворенню крижаних кристалів.
- Потім тканину яєчника поміщають в спеціальний апарат з азотом і температурою -176 градусів Цельсія. У такому вигляді матеріал може зберігатися кілька років.
Аутотрансплантація (повернення) частки яєчника можлива після того, як жінка повністю вилікувалася або хвороба перейшла в стадію стійкої ремісії.
Переваги та недоліки кріоконсервації тканини яєчника
Процедура досить нова, але вже зарекомендувала себе як якісний метод, який може допомогти жінці уберегти репродуктивну систему. Цьому сприяє низка переваг:
- Можливість отримати матеріал для кріозбереження без зволікання.
- Проведення процедури не залежить від менструального циклу.
- Жінка отримує велику кількість здорових яйцеклітин.
- Шанс відстрочити менопаузу.
Єдиним мінусом процедури кріозаморозки тканини яєчника можна вважати те, що для її проведення потрібна операція. Така ж операція необхідна для аутотрансплантації матеріалу в майбутньому.
Кріоконсервація сперми
Кріоконсервація сперми – це сучасна технологія, яка дозволяє заморожувати сперматозоїди чоловіка в лабораторному середовищі, для подальшого використання в програмі ЕКЗ (екстракорпоральне запліднення).
Чому сперматозоїди виживають після кріоконсервації
Учені довели, що заморожені чоловічі статеві клітини не змінюють своєї структури та властивостей, а тому можуть бути використані для подальшого запліднення жіночої яйцеклітини. Еякулят заморожують методом вітрифікації, що дозволяє уникнути утворення кристалів льоду і порушення структури сперматозоїда. Матеріал зберігають за температури -196 градусів Цельсія в спеціально облаштованих кріосховищах.
Чоловіки обирають кріоконсервацію з різних причин, але всі вони зводяться до бажання створити сім’ю і народити здорових дітей.
Показання та протипоказання до застосування заморозки сперми
Кріоконсервація дає впевненість у тому, що жодні обставини не завадять зачати здорову дитину. Заморозити сперму можна з власної волі і за медичними показаннями, а саме:
- Олігоспермія – недостатня кількість сперматозоїдів;
- Астенозооспермія – недостатня рухливість сперматозоїдів;
- Професійний ризик – робота при високих або низьких температурах, контакт з хімічними речовинами, постійне випромінювання, механічні травми;
- Лікування онкологічних захворювань хіміопрепаратами або радіотерапією.
- Перед операціями, які можуть вплинути на репродуктивну функцію (вазектомія, операції на головному мозку);
- Бажання мати дитину в більш зрілому віці;
- Один із способів завести дитину в одностатевих парах.
Методы проведення
Метод проведення кріоконсервації залежить від стану і характеристики клітини або тканини.
- Перший – вітрифікація або миттєве заморожування сперматозоїдів (без кристалізації).
- Другий спосіб полягає у поступовому видаленні рідини з клітини і заміну її кріопротектором.
Етапи кріоконсервації сперми
- Обстеження та підготовка
- Забір біологічного матеріалу
- Кріоконсервація
Кріоконсервація тканини яєчка
Кріоконсервація тканини яєчка – це процедура, під час якої здійснюють забір чоловічих статевих клітин і тестикулярних тканин за допомогою біопсії та заморожують отриманий матеріал в рідкому азоті за температури -196 градусів Цельсія для використання в майбутньому.
Завчасна кріоконсервація тканини яєчка дає можливість зберегти біоматеріал та в перспективі зачати рідну дитину, якщо на чоловіка чекає серйозне лікування, яке може призвести до безпліддя.
Показання до проведення кріоконсервації
У яких випадках рекомендується проведення процедури:
- Бажання чоловіка стати батьком у зрілому віці
- Необхідність лікування онкологічних захворювань (в тому числі, і раку яєчок)
- Перед андрологічними операціями
- Множинні безуспішні спроби екстракорпорального запліднення (ЕКЗ) в анамнезі
- Безпліддя невизначеного генезу і спроби його лікування методами допоміжної репродукції
- При обструктивній (екскреторній) азооспермії
- Якщо чоловік працює на підприємстві з агресивними речовинами й існують ризики пошкодження тканин яєчок.
Етапи проведення
Процедура поягає в заборі тканини яєчка, обробку та оцінку матеріалу в ембріологічній лабораторії, його заморозку і переміщення на зберігання в кріобанк.
Перед біопсією чоловік повинен пройти комплексну діагностику, далі йдуть етапи:
- Біопсія.
- Гістологічна оцінка біологічного матеріалу для встановлення його якості.
- Виділення сперматозоїдів.
- Миттєва заморозка зразків в рідкому азоті.
Переваги кріоконсервації тканини яєчка
На відміну від кріоконсервації сперми, заморозка тканини яєчка також підходить хлопцям, які ще не ввійшли в період статевого дозрівання. До прикладу, про неї варто задуматися перед лікуванням онкології. Але це не єдина перевага процедури. З-поміж інших:
- можливість зачати здорову дитину людям, які вийшли з репродуктивного віку (після 45 років)
- можливість стати біологічним батьком для чоловіків з онкологією після процесу опромінення, яке може спровокувати невиліковне безпліддя
- звільнення від повторного проведення інвазивних процедур з екстракції сперматозоїдів для участі в програмах екстракорпорального запліднення
- підвищення шансу завагітніти за допомогою ЕКЗ, адже таким чином ми отримуємо найбільш активних спематозоїдів
- дружина зможе мати дитину, незважаючи на обструктивну азооспермію чоловіка
- кріоконсервація не має протипоказань для здоров’я чоловіка
- заморожування ніяк не впливає на якість тканини яєчок і сперми
- можливість тривалого зберігання біоматеріалу
- зручність у плануванні лікувального циклу для кожного з партнерів
Для багатьох чоловіків з групи ризику по безпліддю зберегти сперму або тканини яєчок заздалегідь – єдиний шанс мати дитини в майбутньому.
Кріоконсервація ембріонів
Кріоконсервація ембріонів – це найбільш безпечний метод швидкої заморозки ембріонів і зберігання їх в рідкому азоті. Під час такого заморожування припиняються всі біохімічні процеси всередині, що дає можливість зберігати зародки довгий час.
Коли варто проводити заморозку ембріонів?
Кріоконсервація здебільшого використовується під час процедури екстракорпорального запліднення. Під час стимуляції овуляції і пункції яєчників лікар бере кілька яйцеклітин і потім їх запліднює. Тобто, у сімейної пари можуть залишитися невикористані ембріони. Їх зберігають методом кріоконсервації для наступних програм, оскільки завагітніти не завжди виходить з першої спроби.
У здорової жінки до 35 років з 10 яйцеклітин можна виростити приблизно чотири ембріона високої якості.
Їх можуть заморозити на різних стадіях:
- на стадії заплідненої яйцеклітини (зиготи)
- на стадії дроблення
- на стадії бластоцисти (5-6 добу)
Переваги і недоліки
Сучасні кріотехнології дозволили зробити заморожування досить ефективною процедурою. Більше 95% всіх вітрифікованих ембріонів благополучно розморожуються. Частота настання вагітності під час перенесення кріоконсервованих зародків, не поступається (і навіть переважає) показникам свіжих підсадок.
Основна перевага кріоконсервації полягає в тому, що жінка отримує додаткову можливість в перспективі мати біологічно рідну дитину. Через певний час вона може уникнути повторних стимуляції і пункції фолікулів, а просто готується до підсадки нового ембріона. А це менше гормональне навантаження на організм і загальний стрес.
Недоліком цієї процедури вважається можлива втрата ембріонів в процесі заморозки і розморожування. При впливі негативних чинників не всі ембріони зберігають свою життєздатність, тому рекомендують заморожувати відразу кілька.
Також, якщо йдеться про повільну заморозку, то температура навколо клітин знижується поступово. Це дає більше часу для утворення кристалів льоду, які можуть пошкодити яйцеклітини або знищити їх.
Процес кріоконсервації
Підготовка до процедури кріоконсервації ембріонів включає 2 основних етапи:
- Запліднення яйцеклітини за допомогою сперматозоїда в лабораторних умовах.
- Відбір якісних і здорових ембріонів для кріоконсервації за допомогою проведення генетичного аналізу.
Існує 2 способи заморозки – повільна і вітрифікація.
Вітрифікація є особливим методом кріоконсервації, принцип якого полягає в ультра швидкому заморожуванні.
Такі методи виконуються в спеціально облаштованих клініках і лабораторіях, досвідченим та навченим персоналом на 5-6 день життя зародка. Перед початком вітрифікації ембріони обробляються спеціальною речовиною, яка захищає їх від травмування.
Ембріони заморожують і зберігають в рідкому азоті при температурі -196 ° C. Це сприяє тому, що в клітинах повністю припиняються всі біологічні процеси.
Ніякої небезпеки для самого зародка і стану здоров’я майбутньої дитини кріоконсервація не несе. Діти, народжені внаслідок вагітності з використанням кріоконсервованих ембріонів, нічим не відрізняються від інших дітей.
Як зберігаються ембріони?
Після інкубації ембріони переміщують в мікро контейнер – кріопробірку. На ній вказують основну інформацію про пацієнта і кількість зародків (від 1 до 5). Потім її поміщають у посудину Дьюара з рідким азотом та з певною температурою, що сприяє тривалому збереженню.
Час зберігання ембріонів по суті необмежений. Відомо, що успішне підсаджування і народження здорової дитини відбулося через 27 років кріоконсервації.
Вплив кріоконсервації на результат ЕКЗ
Вчені переконують, що в ході протоколу ЕКЗ краще застосовувати вітрифіковані ембріони. Численними дослідженнями доведено, що підсадка заморожених зародків істотно знижує ризик передчасних пологів і, відповідно, ймовірність народження мертвої дитини.
