Криоконсервация яйцеклеток и сперматозоидов

Что такое криоконсервация?

Современные технологии развиваются с бешеной скоростью. В частности медицина на данный момент делает огромные прорывы в поиске решений проблем бесплодия.

Технология глубокой заморозки или так называемая криоконсервация стала прорывом в сфере репродуктологии. Она позволяет быстро заморозить и сохранять клетки или другой биологический материал на протяжении многих лет.

Способы проведения криоконсервации

Во время криоконсервации происходит быстрое замораживание клеток с помощью жидкого азота при температуре -196 градусов по Цельсию. При этом в материале тормозятся все биологические процессы с сохранением жизнеспособности и возможностью дальнейшего использования.

Существуют два способа криоконсервации:

1. Наиболее распространенный – витрификация. Сперму или яйцеклетку погружают в криопротектор, который препятствует образованию кристалликов льда. После данных манипуляций материал обрабатывают жидким азотом и хранят в специальных криостатах годами.
2. Постепенная дегидратация – метод, который позволяет медленно удалять жидкость и заменять ее на криопротектор. После этого проводят заморозку с помощью азота.

Какие существуют виды криоконсервации?

В репродуктологии криоконсервация делиться на три большие группы:

• Криоконсервация половых клеток женщины
• Криоконсервация половых клеток мужчины
• Криоконсервация эмбрионов

Криоконсервация яйцеклеток

Криоконсервация яйцеклеток считается инновационной разработкой в сфере репродуктивной медицины. Эта методика позволяет в лабораторных условиях проводить замораживание женских половых клеток в жидком азоте при температуре минус 196°C. В таком виде материал может сохраняться длительный период для дальнейшего использования в программах ЭКО в любом возрасте.

Показания к проведению

С годами количество ооцитов снижается, а их качество ухудшается. Поэтому лучшим возрастом для заморозки собственных половых клеток считается 20-25 лет. Это период, когда репродуктивная система в хорошем состоянии, а риск рождения ребенка с генетическими отклонениями минимальный.

Но, если женщина немного старше или ей предстоит сложная операция, которая может повлиять на репродуктивную функцию организма, ей тоже стоит обратить внимание на эту услугу. Также, если сделать криоконсервацию яйцеклеток до лечения онкологии, то это разрешит женщине в дальнейшем иметь полностью здорового ребенка по достижению стойкой ремиссии онкологического заболевания.

Для быстрой заморозки ооцитов используется технология витрификации. Именно этот метод позволяет достичь показателя 98% удачной разморозки.

Процедура криоконсервации яйцеклеток состоит из таких этапов:

1. Полное обследование.  Женщина сдает необходимые клинические анализы, проходит инструментальные и лабораторные исследования, осмотр у врача-терапевта, акушера-гинеколога и репродуктолога, а также, если потребуется, получает консультации смежных специалистов.
2. Противозачаточная терапия. Ее назначают на несколько недель. Это необходимо для того, чтобы яичники восстановились и были готовы к гормональной стимуляции.
3. Гормональная стимуляция. Она необходима для получения максимально возможного количества зрелых фолликулов с яйцеклетками. Замораживать лучше сразу несколько ооцитов, но в естественных условиях организм женщины вырабатывает 1-2 яйцеклетки за один менструальный цикл. Этого недостаточно для проведения успешной заморозки и разморозки. Гормональные препараты могут увеличить количество яйцеклеток до десяти и больше.
4. Пункция фолликулов и забор ооцитов с использованием тонкой иглы. Процедура проводиться под седацией пациентки во избежании болевых ощущений и переживаний.
5. Замораживание женских половых клеток с помощью метода витрификации. Он используется для затвердевания клеток до стеклообразного состояния без образования кристаллов льда с помощью высоких концентраций криопротекторов. В клетках, которые находятся в состоянии заморозки, останавливаются все биологические процессы. В то же время яйцеклетки полностью сохраняют свою структуру и функции.
6. Перемещение витрифицированных яйцеклеток на специальные приборы — криотопы. Помещение в контейнеры — сосуды Дьюара, для длительного сохранения. Каждая порция материала имеет индивидуальное маркирование.

Замороженные молодые яйцеклетки могут храниться десятки лет, не подвергаясь старению и вредным взаимодействиям. Это абсолютно безопасная технология, которая требует внимательного подхода и точного придерживания всех требований специалиста, который ее проводит.  

Криоконсервация ткани яичника

Криоконсервация ткани яичника — революционный метод в репродуктологии, который используется для сохранения фертильности пациенток разных возрастов.

В отличии от замораживания яйцеклеток, он применяется, когда нет возможности получить ооциты. К примеру, если речь идет о девушках, не достигших половой зрелости.

Заблаговременная криоконсервация ткани яичника позволяет женщине сохранить возможность забеременеть и впоследствии родить здорового ребенка, если ей предстоит серьезное лечение, которое может привести к бесплодию.

Как проходить процедура криоконсервации ткани яичника?

• Женщина обращается в клинику, врач собирает детальный анамнез и отправляет ее на обследования. Параллельно, заключается договор с криобанком, где будут храниться частицы яичника. Женщину готовят к операции и назначается конкретный день ее проведения.
• Забор материала проводят хирургическим методом с помощью лапароскопии. Это малоинвазивная хирургическая операция.Через маленькие проколы на животе вырезают частицу коры молодого и здорового яичника, которая тут же помещается в холодовой контейнер и транспортируется в лабораторию.
• Лаборант исследует материал на наличие здоровых фолликулов и проводит подготовку ткани к заморозке. Он нарезает материал тоненькими полосками и удаляет жидкость из клеток, чтоб предотвратить образование ледяных кристаллов.
• Потом ткань яичника помещается в специальный аппарат с азотом и температурой -176 градусов Цельсия. В таком виде, материал может сохраняться несколько лет.

Аутотрансплантация (возврат) частицы яичника возможна после того, как женщина полностью вылечилась или болезнь перешла в стадию стойкой ремиссии.

Преимущества и недостатки криоконсервации ткани яичника

Процедура достаточно новая, но уже зарекомендовала себя как качественный метод, который может помочь женщине уберечь репродуктивною систему. Этому способствует ряд преимуществ:

• Возможность получить материал для криосохранения без промедления
• Проведение процедуры не зависит от менструального цикла
• Женщина получает большое количество здоровых яйцеклеток
• Шанс отсрочить менопаузу

Единственным минусом процедуры криозаморозки ткани яичника можно считать то, что для ее проведения нужна операция. Такая же операция необходима для аутотрансплантации материала в будущем.

Криоконсервация спермы

Криоконсервация спермы – это современная технология, которая позволяет замораживать сперматозоиды мужчины в лабораторной среде для дальнейшего использования в программе ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение).

Почему сперматозоиды выживают после криоконсервации

Учеными было доказано, что замороженные мужские половые клетки не меняют своей структуры и свойств, поэтому могут быть использованы для дальнейшего оплодотворения женской яйцеклетки. Эякулят замораживают методом витрификации, что позволяет избежать образования кристаллов льда и нарушения структуры сперматозоида. Весь материал хранят при температуре -196 градусов Цельсия в специально обустроенных криохранилищах.

Существуют разные причины, из-за которых мужчины обращаются к этой технологии, но все они ведут к успешному созданию семьи и рождению здоровых детей.

Показания и противопоказания к применению заморозки спермы

Криоконсервация дает уверенность в том, что никакие обстоятельства не помешают зачать здорового ребенка. Заморозить сперму можна как по собственному желанию, так и по медицинским показаниям, а именно:

1. Олигоспермия – недостаточное количество сперматозоидов;
2. Астенозооспермия – недостаточная подвижность сперматозоидов;
3. Профессиональный риск – робота при высоких или низких температурах, контакт с химическими веществами, постоянное излучение, механические травмы;
4. Лечения онкологических заболеваний, химиопрепаратами или радиотерапией.
5. Перед операциями, которые могут повлиять на репродуктивную функцию (вазэктомия, операции на головном мозге);
6. Желание иметь ребенка в более зрелом возрасте;
7. Один из способов завести ребенка у однополых пар.

Методы проведения

Криоконсервация спермы проводиться несколькими способами в зависимости от состояния и характеристики клетки или ткани.

1. Первый – витрификация, которая заключается в мгновенном замораживании сперматозоидов (без кристаллизации).
2. Второй способ включает в себя постепенное удаление жидкости из клетки и замену ее криопротектором.

Этапы криоконсервации спермы

• Обследование и подготовка
• Забор биологического материала
• Криоконсервация

Криоконсервация ткани яичка

Криоконсервация ткани яичка — это процедура, в ходе которой извлекают мужские половые клетки и тестикулярные ткани, замораживают в жидком азоте ании ткани яичка в жидком азоте при температуре -196 градусов Цельсия для использования в будущем.

Заблаговременная криоконсервация ткани яичка дает возможность сберечь биоматериал и в перспективе зачать родного ребенка, если мужчине предстоит серьезное лечение, которое может привести к бесплодию.

Показание к проведению криоконсервации

В каких случаях рекомендуется проведение данной процедуры:

• Желание мужчины завести малыша в зрелом возрасте
• Необходимость лечения онкологических заболеваний (в том числе, и рака яичек)
• Перед андрологическими операциями
• Множественные безуспешные попытки экстракорпорального оплодотворение (ЭКО) в анамнезе
• Бесплодие неопределенного генеза и попытки его лечения методами вспомогательной репродукции
• При обструктивной (экскреторной) азооспермии
• Если мужчина работает на предприятии с агрессивными веществами и существуют риски повреждения тканей яичек.

Этапы проведения

Процедура включает в себя забор ткани яичка, обработку и оценку материала в эмбриологической лаборатории, его заморозку и помещение на хранение в криобанк.
Но, прежде чем провести биопсию, мужчина должен пройти комплексную диагностикуГ, далее следуют этапы:

1. Проведение биопсии.
2. Гистологическая оценка биологического материала для установления его качества.
3. Выделение сперматозоидов.
4. Мгновенная заморозка образцов в жидком азоте.

Преимущества криоконсервации ткани яичка

В отличии от криоконсервации спермы, заморозка ткани яичка также подходит парням еще не вошедшим в период полового созревания. К примеру, о ней стоит  задуматься перед лечением онкологии. Но это не единственное преимущество процедуры. Среди прочих:

• возможность зачать здорового ребёнка людям, вышедшим из репродуктивного возраста (после 45 лет)
• возможность стать биологическим отцом для мужчин с онкологией после процесса облучения, которое провоцирует неизлечимое бесплодие
• избавляет пациента от повторного проведения инвазивных процедур по экстракции сперматозоидов для участия в программах экстракорпорального оплодотворения
• повышение шанса забеременеть с помощью ЭКО, ведь таким образом мы получаем самых живых спематозоидов
• женщина сможет иметь ребенка, невзирая на обструктивную азооспермию мужчины
• криоконсервация не имеет противопоказаний для здоровья мужчины
• замораживание никак не влияет на качество тканей яичек и спермы
• возможность длительного хранения биоматериала
• удобность планирования лечебного цикла для каждого партнера

Для многих мужчин из группы риска по бесплодию сохранить сперму или ткани яичек заранее — единственный шанс иметь ребенка в будущем.

Криоконсервация эмбрионов

Криоконсервация — это самый безопасный метод быстрой заморозки эмбрионов и хранения их в жидком азоте. Во время такого замораживания прекращаются все биохимические процессы внутри, что дает возможность сохранять зародыши долгое время.

Когда стоит проводить заморозку эмбрионов?

Криоконсервация большей частью используется во время процедуры экстракорпорального оплодотворения. Во время стимуляции овуляции и пункции яичников врач берет несколько яйцеклеток и потом их оплодотворяет. То есть, у семейной пары могут остаться эмбрионы. Их сохраняют методом криоконсервации для использования в следующих программах, поскольку забеременеть не всегда получается с первой попытки.

У здоровой женщины до 35 лет из 10 яйцеклеток можно вырастить приблизительно четыре эмбриона высокого качества. Их могут заморозить на разных стадиях:

• на стадии оплодотворенной яйцеклетки (зиготы)
• на стадии дробления
• на стадии бластоцисты (5-6 сутки)

Преимущества и недостатки

Современные криотехнологии позволили сделать замораживание достаточно эффективной процедурой. Больше 95% всех витрифицированных эмбрионов благополучно размораживаются. Частота наступления беременности во время переноса криоконсервированных зародышей, не уступает (и даже преобладает) показателям свежих подсадок.

Основное преимущество криоконсервации заключается в том, что женщина получает дополнительную возможность в перспективе иметь биологически родного ребёнка. Через определенное время она может избежать повторных стимуляции и пункции фолликулов, а просто готовится к подсадке нового эмбриона. Речь идет о меньшей гормональной нагрузке на организм и общем стрессе.

Недостатком данной процедуры считается возможная потеря эмбрионов в процессе заморозки и разморозки. При влиянии негативных факторов не все эмбрионы сохраняют свою жизнеспособность. Поэтому рекомендуют замораживать сразу несколько эмбрионов.

Также, что касается медленной заморозки, то температура вокруг клеток снижается постепенно. Это даёт больше времени для образования кристаллов льда. Они могут повредить яйцеклетки или уничтожить их.

Процесс криоконсервации

Подготовка к процедуре криоконсервации эмбрионов включает 2 основных этапа:

1. Оплодотворение яйцеклетки с помощью сперматозоидов в условиях лаборатории.
2. Отбор качественных и здоровых эмбрионов для криоконсервации с помощью проведения генетического анализа.

Существует 2 способа заморозки — медленная и витрификация. Витрификация является особенным методом криоконсервации, принцип которого заключается в ультрабыстром замораживании.

Такие методы выполняются в специально обустроенных клиниках и лабораториях, опытным и обученным персоналом на 5-6 день жизни зародыша.Перед началом витрификации эмбрионы обрабатываются специальным веществом, которое защищает их от травматизации.

Эмбрионы замораживают и хранят в жидком азоте при температуре −196 °C. Это способствует тому, что в клетках полностью прекращаются все биологические процессы. В дальнейшем они будут использованные для достижения беременности методом ЭКО.

Никакой опасности для самого зародыша и состояния здоровья будущего ребёнка криоконсервация не несет. Дети, которые рождены вследствие беременности с использованием криоконсервированого эмбриона, ничем не отличаются от других детей.

Как хранятся эмбрионы?

После инкубации эмбрионы перемещают в микроконтейнер — криопробирку. На ней указывают основную информацию о пациенте и количество зародышей (от 1 до 5). Мензурка помещается в сосуд Дьюара с жидким азотом и с определенной температурой, что способствует длительному сохранению.

Время хранения эмбрионов фактически неограниченно. Известно, что успешное подсаживание и рождение здорового ребенка произошло спустя 27 лет криоконсервации.

Влияние криоконсервации на результат ЭКО

Учёные заявляют, что в ходе протокола ЭКО лучше применять витрифицированные эмбрионы. Множественные исследования говорят о том, что подсадка замороженных зародышей существенно снижает риск преждевременных родов и, соответственно, вероятность рождения мертвого ребенка.